尊龙凯时马硫酸雌酮(E1S)ELISA试剂盒仅限于科学研究用途,严禁用于医学诊断。
检测原理
本试剂盒采用双抗体一步夹心法进行酶联免疫吸附试验(ELISA)。在预先包被了adropin(AD)抗体的微孔中,依次添加样本、标准品及HRP标记的检测抗体,经过温育后进行彻底洗涤。随后,通过底物TMB的显色反应,TMB在过氧化物酶的作用下转化为蓝色,最终在酸性环境中显现为黄色。颜色的深浅与样本中adropin(AD)的浓度呈正相关。通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),以此计算样本浓度。
样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用无热原和内毒素的试管,避免操作过程中的任何细胞刺激,采血后在3000转下离心10分钟,迅速小心地分离血清与红细胞。
2. 血浆:使用EDTA、柠檬酸盐或肝素作为抗凝剂,3000转离心30分钟后取上清。
3. 细胞上清液:通过3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织与适量生理盐水混合并捣碎,随后在3000转下离心10分钟取上清。
5. 保存:若样本未及时检测,请按一次用量分装并保存于-20℃,避免反复冻融。使用前应在室温下解冻,并确保样品均匀充分解冻。
操作注意事项
试剂盒组分说明:标准品(S0-S5)浓度依次为0、25、50、100、200、400pg/mL。
试剂的准备
20×洗涤缓冲液的稀释:用蒸馏水按1:20的比例稀释,即1份的20×洗涤缓冲液加入19份蒸馏水。
洗板方法及结果判断
绘制标准曲线:在Excel中以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,绘制标准品的线性回归曲线,利用曲线方程计算各样本的浓度值。
尊龙凯时致力于提供高质量的生物医疗产品,以支持您的科研工作。请遵循以上说明确保实验的准确性和有效性。