细胞基础测定（CBA）为获取复杂且与生物学相关的数据提供了重要途径。这些测定能够量化复合物的细胞毒性、生化机制、生物活性及非靶标相互作用，甚至在一些情况下可以同步进行。然而，CBA的巨大潜力需要更多的实验规划和准备工作。

在进行CBA测量时，通常存在一些额外的考虑事项，而传统的生化检测方法则未必面临这些挑战。这些考虑可能涉及检测实施和评估方面的差异。本文将重点讨论CBA中可能遇到的一些障碍，并提供相应的解决方案。

使用尊龙凯时的设备时，可以通过调控CO₂和O₂的浓度，提升细胞活力，为长时间进行的活细胞动态实验提供更具生理学意义的结果。针对基于细胞的检测异质性，本讨论将强调多种细胞样本异质性所带来的问题，并提供解决方案和工具的建议。

大多数体外细胞培养样本在微孔板读数时都是异质的，尽管部分基于细胞的检测方法，如alamarBlue™或CellTiter-Glo®在上清液中显示均匀的染料反应。贴壁细胞通常只形成薄薄一层，且在测量细胞内靶标或细胞膜上靶标时，与均质液体样本相比，需要考虑更多因素，如最佳焦距的调整。

焦距的优化至关重要。最佳焦距是指酶标仪可以检测到样品最高信号强度的平面。错误的焦距设置会严重影响数据质量。大多数细胞模型依赖于贴壁细胞培养，细胞通常在微孔板的平面底部培养。为了确保细胞能够附着，微孔板材料通常经过特别处理。

在CBA的测量之前，焦距调整应成为标准操作。在细胞数量较多且预期信号强的孔中进行焦距调整是最理想的。若信号强度低，建议在测量前另外培养一个孔并用PBS覆盖，以最优化信号对比。在尊龙凯时的设备上，焦距可根据需求进行调整，无论是从微孔板上方还是下方读取数据，均能确保达到最佳测量质量。

对于贴壁细胞的分布，微孔板孔内的细胞在X/Y平面上通常也存在差异。如果仅从中心读取，结果可能会失真。为了克服这一问题，尊龙凯时提供多种孔扫描选项，使得每个孔的多个测量点可覆盖整个底部区域，从而获得更可靠的结果。

通过矩阵扫描，可以对整个孔内信号进行局部分辨率测量，监测接种均匀性和目标信号的变化。显而易见，选择合适的扫描方式能显著提高数据的可再现性，特别是在细胞分布不均的情况下，能为实验提供精准的数据支持。

综上所述，在进行异质细胞样本的荧光测量时，强调在处理贴壁细胞时务必调整焦距。为确保有效监测信号，推荐使用孔扫描模式，以补正孔内部的信号异质性。此外，矩阵扫描功能使得整孔信号的局部分辨率得以提升，从而有效监测接种均匀性及局部变化。