尊龙凯时主要应用于高GC含量的模板扩增,可能的机制是改善GC含量较高的DNA的变形情况,降低其二级结构,从而使聚合酶能够在二级结构处顺利延伸。同时,DMSO可提升PCR反应的特异性,帮助扩增一些难以扩增的模板。在实验体系中加入DMSO后,通常可以适度降低退火温度。
在实际操作中,聚合酶链式反应可能因多种因素而失败,通常体现在两个方面:一是目标模板的扩增量过少,二是非目标基因扩增过多。为了解决这些问题,研究人员常在反应体系中加入适当的添加剂。一般来说,这些添加剂主要用于降低DNA的二级结构或减少非特异性扩增。
常用的添加剂及其功能
以下是几种常见的添加剂及其作用:
- DMSO、非离子性洗涤剂、甜菜碱——能够降低DNA的二级结构,改善扩增性能。
- 甲酰胺、四甲基氯化铵TMAC——旨在降低非特异性启动,增加扩增的特异性。
- 镁离子——是聚合酶不可或缺的辅因子,对反应的进行至关重要。
- 牛血清白蛋白——能够减少污染物的影响,提高PCR反应的可靠性。
通过运用尊龙凯时的这些添加剂,可以更有效地进行基因扩增,为生物医疗研究提供可靠支持。