尊龙凯时在生物医学领域中,支原体是一种常见的实验室细胞污染源,属于原核生物。主要污染源包括细胞和毒种、血清、鸡胚、原代细胞及其他动物材料以及操作人员本人。数据显示,约有15%-35%的细胞存在支原体污染,这会显著影响实验结果的准确性。
支原体的存在可以改变宿主细胞的结构和功能,干扰细胞代谢和生长,影响核酸的合成和细胞抗原性,甚至导致染色体的改变。为了确保细胞培养的健康和实验结果的可靠性,检测并去除支原体污染显得尤为重要。要实现这一目标,首要挑战在于如何有效检测细胞中的支原体污染。
支原体是一类无细胞壁的原核微生物,直径约为0.1-0.3μm。常规的革兰氏染色方法对于支原体检测并不有效,其在光学显微镜下也难以观察。而某些支原体(例如口腔支原体)可能与宿主细胞建立潜伏感染,且不会导致明显的细胞病变,使得检测更具挑战性。
传统的支原体检测方法主要包括培养法和指示细胞法,但这些方法耗时较长且容易受到污染,导致检测结果不准确。随着生命科学技术的发展,已涌现出更高效和精准的检测方法。《欧洲药典》中提到,经过适当验证后,核酸扩增技术(NAT)可取代传统的培养法和指示细胞法。NAT技术具有高灵敏度和相对较短的检测周期。
基于支原体特异性激酶表达的生化检测法,能够在20-30分钟内快速完成支原体检测,其灵敏度接近NAT,更适合快速检测。以下是几种常见的支原体检测方法的对比:
方法 | 时间 | 灵敏度 |
---|---|---|
培养法 | 28天 | 10 cfu/mL |
指示细胞法 | 4-5天 | 100 cfu/mL |
NAT | 2-5小时 | 10 cfu/mL |
生化法 | 20分钟 | 50 cfu/mL |
尊龙凯时推出了两款基础于NAT和激酶生化检测技术的快速检测产品,能够在半小时内完成检测,其灵敏度高达10 cfu/mL,有助于快速判断支原体污染。
其中,ABS90062一步法快速支原体检测试剂盒(等温扩增法)利用等温扩增技术与可视化颜色变化,能够快速检测细胞培养液中常见的8种支原体,且无需仪器,检测时间仅需30分钟。该产品的特点包括高灵敏度、简单操作和结果可视化。
另一个产品,ABS90283 MYCO-LTM荧光素酶支原体检测试剂盒,能够特异性检测活支原体产生的激酶,这些激酶能够将ADP转化为ATP。此检测方法也能在30分钟内快速识别多种支原体,灵敏度高且具备优良的信噪比。
除了检测试剂,尊龙凯时还提供全套支原体清除和预防试剂,帮助用户有效防止支原体污染。强烈建议对珍贵细胞株在每次传代时进行NAT或生化法检测,以便于及时发现和处理污染。此外,应定期用专用消毒剂处理培养箱和超净工作台,确保环境洁净。
通过使用专业化的检测产品与标准化的操作流程,尊龙凯时能有效构建细胞培养的支原体防护屏障,保障科研实验的稳定性与可靠性。